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兽医硕士论文(范文6篇),畜牧兽医毕业论文题目

兽医硕士论文(范文6篇)

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兽医硕士论文(范文6篇)范文

兽医硕士论文一:不同因素对小鼠冷冻精子体外受精的影响

本文的目录导航:

【标题】不同因素对小鼠冷冻精子体外受精的影响
[第1章]小鼠体外受精和精子冷冻研究简介
[第2章]小鼠精子冷冻保存材料和方法
[第3章]体外受精和精子冷冻保存结果
[第4章]不同密度冷冻精子对小鼠体外受精的影响
[第5章-参考文献]小鼠冷冻精子和体外受精的研究结论

[概要/S2/]

近年来,随着小鼠品系数量的增加和大量适合不同研究需求的转基因小鼠的出现,传统的保护方法已经不能满足人们的需求。精子冷冻保存作为保存动物种质资源的有效方法,在实验动物中得到广泛应用。该方法具有方便、快速、成本低的优点,受到研究者的青睐。同时,也面临着体外受精率不稳定、胚胎发育迟缓、后代成功率低等问题。冷冻精子复苏后。因此,本文研究了影响小鼠冷冻精子体外受精的相关因素,并初步探讨了各种因素对冷冻精子体外受精影响的机理,以期建立冷冻精子体外受精的优化体系。
本研究采用中佳达精子冷冻保存法对小鼠精子进行冷冻保存。复苏后,TYH作为获能液,HTF作为精液,HTF/KSOM作为早期胚胎培养液。根据控制变量原理,对不同密度、不同获能时间、是否在精液中添加还原型谷胱甘肽、不同品系背景、不同周龄、不同基因型的小鼠冷冻精子进行体外受精实验。对早期胚胎发育结果(受精率、卵裂率、优质4细胞胚胎率、胚泡率)进行比较分析,评价其体外受精效果。
结果表明,小鼠冷冻精子密度不同,体外受精和早期胚胎发育有显著差异。密度太低,体外受精早期胚胎发育效果极差,密度太高。虽然受精率下降不多,但卵裂率低,密度在0.8-2.0×106/m·L范围内可获得较好的体外受精效果。不同获能时间的冷冻精子体外受精数据表明,获能时间不同,体外受精效果也不同。当获能时间太短(5分钟)或太长(90分钟)时,受精率、卵裂率、高质量4细胞胚胎率和胚泡率最差。当获能时间为20-40分钟时,体外受精效率最高。精子中添加还原型谷胱甘肽能显著提高冷冻精子的体外受精率和卵裂率,但对高质量的4细胞胚胎率和胚泡率影响不大。8种不同品系背景的冷冻精子早期胚胎发育存在显著差异。不同品系冷冻精子的低温生物学特性不同。杂交菌株和封闭群冷冻精子的体外受精效果明显优于近交系。5个品系冷冻精子与同一品系新鲜精子的水平比较表明,冷冻精子的体外受精效率明显低于新鲜精子,且下降程度不成比例。不同周龄小鼠冷冻精子体外受精结果也有显著差异。冷冻精子储存和体外受精不适用于一周龄(小于8周龄)的小鼠。对于一周大(30-34周)的小鼠,胚泡率大大降低。12-30周龄小鼠冷冻精子体外受精和早期胚胎发育较好,以12-24周龄为最佳。相同遗传背景和不同基因型小鼠冷冻精子的体外受精率、卵裂率、高质量4细胞胚率和胚泡率也有显著差异。
总之,小鼠冷冻精子的体外受精和早期胚胎发生受精子密度、获能时间、精液中是否添加还原型谷胱甘肽、品系背景、周龄、基因型等因素的影响。在冷冻保存复苏培养体系下,小鼠冷冻精子体外受精的最佳密度为0.8-2.0×106细胞/米·升,最佳获能时间为20-40分钟。向受体精液中添加还原型谷胱甘肽可以有效提高受精效率。小鼠精子冷冻保存前,应注意菌株背景、年龄和基因型,以便可控地选择合适的冷冻方法,达到最佳的恢复效果。

关键词:体外受精;老鼠;精子冷冻保存;早期胚胎

摘要

近年来,由于小鼠品系增长迅速,大量出现了用于不同研究需要的转基因小鼠,传统的保护方法已不堪重负。因此,精子冷冻保存已广泛应用于实验动物,是动物种质资源保存的有效手段。该方法简便、成本低,已被研究者广泛应用。然而,这种方法仍然存在许多问题,如精子复苏后在体外冷冻保存受精过程中,有时受精率不稳定,胚胎发育受阻,产生后代的成功率较低。本文对影响小鼠冷冻精子体外受精的因素进行了研究,并对影响冷冻精子体外受精的因素的机理进行了初步探讨,以期建立冷冻精子体外受精的最佳体系。
本研究采用中佳达改良精子冷冻保存方法进行实验,R18S3作为小鼠冷冻保存液。采收后,以秋葵为获能液,HTF为施肥培养基,HTF/ KSOM为早期苔藓培养基。利用控制变量原理进行不同密度、不同获能时间、是否在受精培养基中添加谷胱甘肽、不同品系、不同年龄和基因型的体外受精实验。对胚胎早期发育的结果(受精率、卵裂率、优质4细胞胚率和囊胚率)进行了比较和分析。对体外受精的效果进行了评价,并初步探讨了各种因素的作用机理,以期建立冻融精子体外受精的最佳体系。
结果表明:
小鼠冷冻精子密度不同,玻璃化冷冻和早期胚胎发育差异显著。当精子密度过低时,体外受精效果很差。精子密度过高时,受精率略有下降,但清洁率较低。这可以获得更好的体外受精结果。不同获能时间体外受精的效果不同。当获能时间太短(5分钟)或太长(90分钟)时,受精率、卵裂率、高质量4细胞胚率和胚泡率最差。当获能时间为20-40分钟时,玻璃化转变效率最高。在受精培养基中添加谷胱甘肽能显著提高体外冷冻精子的受精率和卵裂率,但对高质量4细胞胚胎和胚泡率影响不大。8个不同品系小鼠冷冻胚胎体外受精早期胚胎发育差异显著。
不同品系的小鼠精子在低温下具有不同的生物学特性。杂种和封闭群优于自交系。冷冻精子体外受精明显比新鲜精子差,且下降不成比例。不同年龄小鼠冷冻精子体外受精的结果也不同。精子冷冻保存和体外受精不适用于8周龄以下小鼠。30-34周龄以上小鼠的最后一次包囊率大大降低。冷冻精子体外受精和早期胚胎发育在12-30周龄小鼠中效果较好。其中12-24周最好。不同基因型小鼠冻融精子体外受精率、卵裂率、高质量4细胞胚率和胚泡率差异显著。
综上所述,冷冻精子体外受精和小鼠早期胚胎发育受精子密度、获能时间、是否在受精培养基中添加谷胱甘肽、菌株背景、年龄、基因型等因素的影响,额精子体外受精的最佳密度为0.8-2.0×106/m·L,最佳获能时间为20 min-40 min。在施肥培养基中添加谷胱甘肽能有效提高施肥效率。为了选择合适的冷冻方法达到最佳的复苏效果,小鼠精子冷冻前应注意其菌株背景、年龄和基因型。
关键词:体外受精;鼠标;精子冷冻保存;早期胚胎

目录

摘要
英文摘要

1序言
1.1体外受精
1.1.1体外受精概述
1.1.2体外受精的应用
1.1.3体外受精的影响因素
1.1.4体外受精的研究进展

1.2精子冷冻保存
1.2.1精子冷冻保存概述
1.2.2冷冻保存原理及冷冻保存对精子功能的影响
1.2.3精子冷冻保存方法
1.2.4精子冷冻保存的应用
1.2.5精子冷冻保存的研究进展
1.3研究目的和意义

2材料和方法
2.1材料
2.1.1实验动物和样品
2.1.2实验试剂
2.1.3主要仪器和设备的制备
2.1.4主要培养液

2.2测试方法
2.2.1小鼠精子冷冻保存
2.2.2冷冻精子复苏
2.2.3体外受精和早期胚胎培养
2.2.4受精卵和早期胚胎质量评估
2.2.5实验设计
2.2.6实验数据的统计分析

3结果
3.1体外受精与早期胚胎发育形态学观察
3.1.1冷冻精子、体外受精与受精卵观察
3.1.2早期胚胎发育观察
3.2不同密度小鼠冷冻精子体外受精

3.3不同获能时间小鼠冷冻精子体外受精
3.4添加还原型谷胱甘肽的小鼠冷冻精子体外受精
3.5不同品系背景小鼠冷冻精子体外受精
3.5.1不同品系背景小鼠冷冻精子之间的比较
3.5.2不同品系背景小鼠冷冻精子与同一品系新鲜精子之间的比较

3.6不同周龄小鼠冷冻精子的体外受精
3.7不同基因型小鼠冷冻精子的体外受精

4讨论
4.1不同密度冷冻精子对小鼠体外受精的影响
4.2不同获能时间对小鼠冷冻精子体外受精的影响
4.3精液中添加还原型谷胱甘肽对小鼠冷冻精子体外受精的影响

4.4不同菌株背景对小鼠冷冻精子体外受精的影响
4.5不同年龄对小鼠冷冻精子体外受精的影响
4.6不同基因型对小鼠冷冻精子体外受精的影响
5结论
感谢

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