50000字硕士毕业论文杀鼠剂醇提取物的纯化及药理作用分析

论文类型：硕士毕业论文

论文字数：50000字

论点：炎症,实验,镇痛

论文概述：

本论文参考国内外相关文献，从鼠妇醇提物中分离纯化出组分D,对鼠妇醇提物进行镇痛、抗炎、抗氧化药理活性研究。薄层层析实验只能证明组分D中含有化学物质的种类，未分离纯化出有抗炎镇

论文正文：

第一章前言

炎症和疼痛是身体最常见的病理症状。炎症是具有血管系统的活组织对损伤因子的防御反应。其局部临床症状为红肿、疼痛和功能障碍。可以看出，当炎症发展到一定阶段时，疼痛是不可避免的病理反应。此外，一些炎症物质如缓激肽和聚乙二醇本身也是引起疼痛的物质。因此，可以说炎症反应是人体对有害刺激最原始的保护性反应，是最基本的病理过程，也是许多不同类型疾病的共同病理基础。目前，临床上用于抑制炎症反应的药物有多种。主要有非甾体抗炎药和免疫药(NSAIDs)、甾体抗炎药和免疫药(SAIDs)以及椎间盘酶修饰药(DMDs)。非甾体抗炎药可抑制环氧化酶的活性，阻断体内花生四烯酸形成前列腺素，并抑制前列腺素的生物合成。它们对控制风湿病和类风湿性关节炎的症状有确切的治疗效果，但它们不能完全治愈或防止疾病的发展和并发症的发生。类固醇抗炎免疫药物主要指糖皮质激素类。这些药物有很强的抗炎作用。它们可以通过激活特定的糖皮质激素受体和促进抗炎多肽的产生来抵抗由各种原因引起的炎症。然而，长期大规模应用此类药物会引起许多不良反应，如肾上腺皮质激素功能亢进综合征。疾病调节药物主要包括免疫增强剂、免疫抑制剂和免疫调节剂。中药中的糖类、苷类和生物碱类等多种活性成分会影响炎症免疫反应。因此，近年来，人们越来越重视从中药中寻找毒副作用小的新型天然抗炎药物，并探索有效成分，已成为研究热点。
在过去的20多年里，中国的抗炎科学，特别是抗炎中药研究有了很大的发展。开发了雷公藤、昆明山海棠及其化合物等多种抗炎中药，并对多种传统的抗风湿药物、清热解表药物进行了深入的抗炎科学研究。实验方法不断增加、更新和改进。
抗炎作用的研究方法很多。在抗炎实验中，需要根据中医理论建立相应的疾病、症状和证候病理模型，以防止抗炎研究中假阳性结果的发生。无菌性炎症(或非特异性反应)是动物体内或体外各种炎症因子在一定阶段引起的炎症或细胞组织反应。一般炎症模型是非特异性的，针对炎症过程发展的三个阶段，设计了三个方面的动物模型:(1)以血管通透性增加为主要变化的各种急性炎症模型(如血浆蛋白渗出量、肿胀程度等的测定)。)；(2)以白细胞迁移为主要指标的白细胞趋化炎症模型；(3)以肉芽肿性组织增生为特征的各种慢性炎症模型。
(1)炎症ⅰ期动物模型在中药研究中的应用
早期炎症的主要表现为毛细血管扩张、渗透性过高、渗出和水肿。许多具有一定刺激性的炎症因子和异物会在特定部位产生上述反应。
(1)炎性肿胀模型
的应用可根据不同的炎性部位分为足肿胀和耳廓水肿模型[21]。足部肿胀模型常用的炎症因子包括角叉菜胶、新鲜蛋清、甲醛、葡聚糖、酵母、组胺、高岭土、琼脂、缓激肽、5-羟色胺、前列腺素E2等。然而，二甲苯或巴豆油混合物(含有2%巴豆油、5%蒸馏水、20%无水乙醇和73%乙醚)通常用作小鼠耳廓水肿的炎症剂。
(2)毛细血管通透性模型的应用
当炎症因子诱导毛细血管通透性增加时，染料伊文思蓝与血浆蛋白的结合会渗出。用比色法或荧光法定量测定染料量，染料量在一定程度上反映血浆蛋白的渗出量。
(2)炎症2期动物模型在中医研究中的应用
胸膜炎模型不仅能检测白细胞的迁移和分泌功能，还能反映血管通透性的变化。角叉菜聚糖或乙酸常被用来制作模型，可以测量渗出物中白细胞的含量，也可以测量PG、组胺、5-羟色胺、缓激肽等的含量。

(3)肉芽肿模型在中医研究中的作用
晚期炎症以纤维组织增生和肉芽屏障形成为特征。肉芽肿模型主要诱导肉芽增生，类似于临床炎症后期的病理变化。炎症因子是具有不同性质的异物，如无菌棉球、塑料环、滤纸片、琼脂等。大鼠巴豆油制粒胶囊中胶囊壁重的测定方法可以指示炎症屏障的形成能力。
近年来，随着中草药研究的不断扩大和深入，中草药的作用和西药的药理研究在某些方面达到了相同的目标，进而阐述了中草药的作用机理。一些中药滋补剂在此类研究中强调了强身健体、抗衰老和抗疲劳的作用，这归因于中药的抗氧化作用。
综上所述，中药因其明显的抗氧化作用而受到临床的重视，制剂种类繁多，效果显著。其许多制剂已成为中老年患者的必备药物，有助于提高机体的生活效率，即延长生存时间和提高活力。

第二章杀鼠剂镇痛成分的分离提取..........................................................17
2.1实验材料和仪器.................................................................................................17
2.2实验方法..............................................................................................................19
2.3实验结果和分析.................................................................................................27
2.4本章概述..............................................................................................................34
第三章杀鼠剂醇提物毒性的实验研究........................................................35
3.1实验材料和仪器.................................................................................................35
3.2实验方法..............................................................................................................35
3.3实验结果和分析.................................................................................................36
3.4本章概述..............................................................................................................37
第四章灭鼠剂醇提物镇痛作用的研究........................................................38
4.1实验材料和仪器.................................................................................................38
4.2实验方法..............................................................................................................39
4.3实验结果和分析.................................................................................................41
4.4本章概述..............................................................................................................49
第五章杀鼠剂醇提取物抗炎作用的研究....................................................................50
5.1实验材料和仪器.................................................................................................50
5.2实验方法..............................................................................................................50
5.3实验结果和分析.................................................................................................51
5.4本章概述..............................................................................................................55
第6章杀鼠剂醇提取物的抗氧化活性....................................................................57
6.1实验材料和仪器.................................................................................................57
6.2实验方法..............................................................................................................58
6.4本章概述..............................................................................................................63
第七章结论与展望..............................................................................................64
参考............................................................................................................67

第七章结论和展望

7.1结论
中药在预防疾病、治疗疾病、保护人民健康方面发挥着重要的作用。迄今为止鼠妇尚未被正式作为一种中药为中国药典或各地地方标准所收录。更未见国内外对其化学成分的报道。本论文研究鼠妇有效化学成分的分离、纯化及其抗炎镇痛方面的药理作用，并从鼠妇醇提物中分离纯化出有效成分D。得到实验结果如下：
（1）正交设计优选乙醇回流提取工艺确定最佳工艺为：5g鼠妇粉（20目）加20倍95％乙醇提取45min。验证实验表明该工艺重现性好，稳定可行。
（2）鼠妇醇提物毒性极低，昆明种小鼠灌胃给予鼠妇醇提物的最大给药量大于100g生药/kg（18g浸膏/mL），口服给药安全。
（3）鼠妇醇提物具有强效的镇痛作用，对大鼠甩尾，小鼠热板以及醋酸引致小鼠疼痛反应具有明显的镇痛疗效，大、中、小剂量均能减少小鼠扭体次数（p