除草剂生物测定方法及操作方法,除草剂生物测定技术有哪些应用方面

除草剂生物测定方法及操作方法

除草剂生物测定的应用有哪些方面？稗草对7种除草剂的敏感性及生物测定方法的研究:稗草是世界范围内的恶性杂草[1]，也是我国[农田15种严重有害杂草之一。它对水稻生产尤其有害，仅稻田的破坏面积就达到1400万hm2·[3]。根据王强等人[4]对浙江省稻田杂草发生类型和危害的调查表明

说一下除草剂农药生物测定的现状和除草剂的农药生...

有关详细信息，请参考农药生物测定标准操作规范-除草剂滚筒作为除草剂子滚筒之一。本书根据两个主要部分:目标和应用技术，系统地收集和整理了与除草剂生物测定有关的155个标准操作程序标准。 其中，目标部分包括除草剂生物测定目标的选择标准和杂草种子的收集。研究了稗草对7种除草剂的敏感性及生物测定方法的研究。稗草是世界范围内的恶性杂草[1]，也是中国农田15种严重有害杂草之一[2]。它对水稻生产尤其有害，仅稻田的破坏面积就达到1400万hm2·[3] 据王强等[4]对浙江省稻田杂草发生及危害的调查表明，稗草是一种稻田。

除草剂生物测定技术有哪些应用方面

除草剂生物测定的应用有哪些方面？稗草对7种除草剂的敏感性及生物测定方法的研究:稗草是世界范围内的恶性杂草[1]，也是我国[农田15种严重有害杂草之一。它对水稻生产尤其有害，仅稻田的破坏面积就达到1400万hm2·[3]。根据王强等人[4]对浙江省稻田杂草发生类型和危害的调查表明

说一下除草剂农药生物测定的现状和除草剂的农药生...

除草剂生物测定方法及操作方法范文

摘要:简要介绍了除草剂的生物测定方法，重点介绍了组织或器官水平测定、全株水平测定、酶水平测定、细胞或器官水平测定四种方法，并总结了生物测定的生物选择、除草剂浓度设定和应用方法。

关键词:除草剂；生物测定方法；操作方法

生物测定技术是除草剂研究的基础工作。它是除草剂活性测定、安全检测和残留诊断的常用方法。它在除草剂新产品的研发中发挥着不可替代的作用，也是高通量筛选[1]不可或缺的手段之一。

1除草剂生物测定方法

除草剂的主要生物测定方法包括滴注法、小杯法或培养皿法、浮萍法、玉米育苗法、黄瓜育苗法、燕麦育苗法、萝卜子叶法、番茄水培法、稗草下胚轴法等。[2]。除草剂可以控制生长激素的分泌，干扰蛋白质、叶绿素、脂类等的生物合成。，抑制光合作用、细胞分裂、呼吸等。使用活生物体作为目标是生物测定中的常见选择。生物测定中目标生物的生长发育、生理生化指标和形态变化可作为确定除草剂生物活性的依据。此外，除草剂的不同作用方式决定了除草剂生物测定中目标生物的选择和测定方法。

1.1组织或器官水平测定

叶、种子、根尖等通常用于组织或器官水平的测定，并且通常在实验室中进行。当选择种子作为生物测定的试验材料时，通常采用小杯法或培养皿法。培养皿法的培养基一般为常规自来水，培养皿中垫有两层滤纸，滤纸上均匀撒有一定数量的种子，待测除草剂按照预先设定的浓度梯度稀释。然后用移液管枪将不同浓度梯度的除草剂加入培养皿中，放入培养箱中，设定合适的温度和湿度，进行培养。小杯法可采用灭菌过筛后的沙子，将细砂均匀填充到小杯的固定位置，在沙子上均匀撒上一定量的种子，然后用厚度基本相同的细砂覆盖。地上植物的鲜重、株高或主根长可以作为衡量指标。使用的具体指标应根据初步试验结果确定，但所选指标应具有稳定性好、相关性好、易于测量的特点。最广泛使用的是主要的根寿命试验方法。例如，油菜或玉米主根寿命试验方法用于测定磺酰脲类除草剂[3，4]的残留活性。选择种子作为试验原料时，被测种子必须接近一年或两年，必须进行初步试验，以保证种子的高发芽率和稳定发芽势，否则会影响试验结果。

1.2全厂水平的测定

全株除草剂活性的测定通常在温室中进行。试验植物在不同规格的花盆或培养皿中培养，然后根据试验预设按照一定的浓度梯度稀释试验除草剂。试验植物用喷雾法处理。根据除草剂的特点，在除草剂作用症状明显后，进行两次观察、测量、记录和评价。评价指标有株高、鲜重、死亡率等。还可以对植物损伤的症状进行分类，然后可以计算综合植物毒性指数[5]。根据被测植物除草作用的显著症状，可进行从无明显症状到最明显症状的分类，可分为5-7级。然后统计记录每个培养皿或花盆中被测植物的除草作用症状，计算植物毒性综合指数，最后根据植物毒性综合指数确定除草活性。

综合指数(%)=([每盘或每盆植物在每种损伤水平下的数量×水平)/(每盘或每盆植物的数量×最高水平)]×100。

新鲜/干重抑制率也可用于分类。唐庆红等人研究了新型除草剂普罗帕酮在油菜田的除草谱，并根据其对普罗帕酮的反应程度将20种杂草分为5类。它们非常敏感(防治效果在90%以上)、敏感(防治效果在80%至90%之间)、中度敏感(防治效果在60%至80%之间)、一般抗性(防治效果在30%至60%之间)和抗性杂草(防治效果在30%以下)。研究结果表明，在600g·a . I/hm2的推荐剂量下，以鲜重控制效果为评价指标，对山羊草、日本山羊草、早熟禾等10种杂草进行了评价。草地早熟禾、荠菜、草、繁缕、榛子、毛茛、硬草和藜对甲氰菊酯更敏感。

1.3酶水平的测定

酶水平的生物测定要求除草剂的目标是已知的。例如，草甘膦的目标是EPSP合成酶，它是芳香族氨基酸合成中的一种重要酶。莽草酸的积累可能是由抑制EPSP合成酶活性引起的。因此，草甘膦的活性可以通过测量植物中莽草酸的积累来确定，[6](普林尼·威·阿等人，1999；Fuchs M. A .等人，2002年)。此外，磺酰脲类除草剂的靶标是乙酰乳酸合酶，因此植物对磺酰脲类除草剂的敏感性可以通过乙酰乳酸合酶[7]的活性变化来确定。

1.4细胞或细胞器水平的测定

具有特定作用机制的除草剂可以在细胞或细胞器水平上测定，线粒体和叶绿体中特定生理生化反应的测定占大多数。在分离的线粒体中，氧吸收和磷氧比可以通过瓦尔的呼吸装置来测定呼吸抑制剂除草剂[8]的活性。光合抑制剂除草剂如三嗪作用于光系统ⅱ中质体醌QB的结合位点。与D1蛋白结合的质体醌QB的取代导致电子转移被阻断。这种除草剂可以测量希尔反应活性。通过测定铁氰化钾的光还原转化为氧释放活性，可以很好地反映除草剂[9]的除草活性。此外，细胞器中特定物质含量的测定也可用作除草活性评价的测定指标，如叶绿素含量测定。当用于测定新型磺酰脲类除草剂HNPC- C9908的活性时，藻细胞中叶绿素含量随着被测试剂浓度的增加而逐渐降低，表现出良好的量效关系[10]。

2除草剂生物测定操作方法

2.1生物测定中测试生物的选择

在除草剂的生物测定中，经常使用植物，但是在特殊情况下也可以选择其他生物。在实际操作中，根据不同的实验目的选择不同的作物或杂草。例如，有必要测量除草剂对特定作物或杂草的生物活性，并且特定作物或杂草被用作实验材料。为了测定除草剂在土壤或水中的残留量，应通过预试验或实际经验筛选敏感植物，然后利用敏感植物在土壤或水中的生存条件，通过一系列试验设计确定残留情况。一般来说，在生物测定中选择试验植物应遵循以下原则:第一，试验植物的来源应充足，个体应基本相同；第二，受试植物对除草剂的反应是有规律的，例如，剂量和死亡率(或生理生化指标)在一定范围内有一定的相关性(正相关性或负相关性)。第三，这种现象是可重复的，即在相同或相似的实验条件下，正相关效应可以重复显示。在材料选择上，高等被子植物主要用作生物检测材料，有时低等生物如藻类也可以选择作为生物检测材料，主要是藻类作为低等生物，材料生长均匀一致，生长期短，生理生物指标明显，准确性高。在实际操作中，对于实验条件完善、实验设备齐全的实验室，可以考虑藻类生物测定。对于基层实验单位，如农业技术推广系统、基层农业广播学校等技师培训机构，建议使用农作物或杂草作为指示植物，更有利于操作和观察。

2.2生物测定中除草剂浓度的设定

在除草剂的生物测定中，需要进行一系列浓度(或剂量)设置，这些设置可以是等差或几何级数的形式。原则上，浓度(或剂量)设置应大于5，并应设置空白色控制或清水控制，以及标准样品控制或当地常用除草剂控制(如有必要)。待测除草剂的浓度设置应在目标植物的正常反应范围内。一般认为，目标植物对被测除草剂的反应浓度(或剂量)设定在0%~90%是相对合理的，可以得到相对准确的回归方程。EC10、EC50、EC90等测试所需的浓度(或剂量)。可以通过使用回归方程来计算。为了保证试验条件的一致性和试验结果的可比性，试验前应将原药配制成一定浓度的母液，然后采用梯度稀释法。试验方法还应根据除草剂的使用方法选择喷洒处理或土壤处理。喷涂处理时，喷涂设备应具有良好的性能，液滴应均匀。如果没有好的喷洒设备，可以使用滴定方法，即使用微量移液管将定量药液滴在被测植物的特定部位，如植物的第二片展开叶上。这种方法可以避免不均匀喷雾液滴造成的人为误差。使用土壤处理时，应先制备一定浓度的有毒土壤，并逐渐稀释成同一土壤的梯度浓度，均匀分散，适用于[11]的相应处理。所有测试浓度(或剂量)应重复3次以上。

2.3生物测定在新农药筛选中的应用

筛选目标化合物除草活性的一般步骤如下:1 .确定生物活性，在相同植物试验材料和相同剂量下对新化合物进行常规筛选，确定化合物的活性；2.确定活性大小，通过设定梯度浓度初步确定目标化合物的活性大小；3.确定除草剂的作用特征和特性，通过连续筛选和再筛选，逐步增加目标杂草的种类，扩大试验作物的范围。研究除草剂本身及其应用的特点，确定除草剂的施用剂量、选择性、杂草谱和施用阶段，进而确定作物的安全性和除草剂残留消解动态[12，13]。目前，培养皿法，即种子萌发法，常用于新农药的生物测定。具体方法是将目标生物的种子放入覆盖有双层滤纸的培养皿中。用移液枪将稀释成梯度浓度的目标除草剂加入人工气候箱中培养。7天后，计数种子的生物指标，通过发芽率、鲜重、根或茎抑制等数据计算抑制浓度，从而判断和比较目标除草剂[4的生物活性。种子萌发法在筛选新的除草剂化合物方面有一定的局限性，氨基甲酸酯类除草剂筛选率高。然而，大部分光合抑制除草剂[2]难以检测，因此在筛选新的除草剂化合物时应进一步开发新的方法和新思路，以避免化合物的错误选择和遗漏筛选。

参考

宋晓玲，马波，黄巢父，等.除草剂生物测定方法[.杂草科学，2004(03):1- 5。

苏少泉、宋顺祖。中国农田杂草化学防除[。北京:中国农业出版社，1996。

姚董瑞，陈杰，宋晓玲，等。绿磺隆在三种土壤中的降解[[]。江苏农业科学杂志，1998，14(04):215- 219。

范志金，钱樊川，陈俊鹏，等。单嘧磺隆对小麦的安全性及其在麦田除草效果的研究。[。中国农业科学通报，2003，19(03):4- 8。

朱秋华，朱云志，盛强。苯并噻唑酰胺和苄嘧磺隆的实验室配方筛选试验[[]。杂草科学，2002，(04):15- 17。

[6]普林尼·w·a·吴·j·r·哈齐奥斯·K..温度和化学添加剂对转基因抗除草剂大豆对草铵膦和草甘膦反应的影响应用[。农药生物化学和生理学，1999，65:119- 131。

谢娜，毕亚玲，李徐灵，等。不同玉米品种对氯嘧磺隆的抗药性差异及其机制[。植物保护杂志，2012，(06):567- 572。

[8]盛强。杂草科学[。北京:中国农业出版社，2001。

谭惠芬、刘华银、杨华正。希尔反应测定中新抑制剂活性的鉴定方法[。植物生理学通讯，1998，34(02):126- 129。

欧晓明，雷满祥，黄知止，等。新型除草剂HNPC- C9908对小球藻生长影响的研究。[。《农学学报》，2003，5(03):16- 23。

宋晓玲，马波，黄巢父，等.除草剂生物测定方法[.杂草科学，2004，(03):1- 5。

陈婉仪、薛向真、王悟能。[新农药的研究与开发。北京:化学工业出版社，1999。

陈念春。农药生物测定技术[。北京:北京农业大学出版社，1991:208- 230。

王树峰，许李赣，马健怡，等。除草剂生物筛选进展[。《农学学报》，2002，4(04):3- 9。