45700字硕士毕业论文PCNA、p27和PTEN基因在口腔白斑鳞状细胞癌中的表达

论文类型：硕士毕业论文

论文字数：45700字

论点：蛋白,口腔,表达

论文概述：

口腔癌前病变到口腔鳞状细胞癌组织，PCNA 蛋白的表达呈逐渐上升趋势，且经统计学分析发现单纯增生白斑、口腔白斑不典型增生、口腔鳞癌中蛋白表达量增加差异具有统计学意义，

论文正文：

前言

近年来，我国口腔粘膜病科的疾病谱发生了明显变化，口腔癌前病变和癌前状态的比例较过去大幅上升。根据世界卫生组织的定义，口腔癌前病变是指经历了形态变化的组织，其比具有相对正常外观的组织更有可能发生癌症。癌前病变疾病包括口腔白斑、红斑等。癌前状态是指显著增加患癌症风险的一般状态，[1]，包括口腔扁平苔藓、口腔粘膜下层纤维化、盘状红斑狼疮、上皮性角化过度、先天性角化不良、梅毒和色素性干皮病。关于白斑癌变率，相关文献报道不一，最高可达50%以上，但一般认为超过5%；临床研究发现，10% ~ 20%的上皮发育不良白斑会发展成口腔癌，20% ~ 30%的上皮严重发育不良，43%的严重发育不良白斑会发展成口腔癌。红斑癌变率较高。临床上，80%的红斑病例病理切片为浸润性癌或原位癌。口腔癌前状态下糜烂性扁平苔藓和萎缩性扁平苔藓的癌变率较高，报告率为10%。口腔癌前病变癌变率高。国内外研究发现，90%以上的口腔鳞状细胞癌是由口腔癌前病变发展而来的。因此，提高口腔癌前病变的诊治水平具有重要意义。口腔白斑和口腔扁平苔藓发病机制的研究也成为欧美国家口腔医学的热点之一。
目前，诊断口腔癌前病变和口腔癌的金标准仍然是口腔病变部位的活检。然而，这种检查是创伤性的、不可重复的，病人的依从性相对较差。此外，病变部位的选择具有很强的主观性，这将影响临床疾病的正确诊断、治疗和预后评估。此外，该标准缺乏能够具体反映癌前病变的系统状态的指标。因此，有必要开发一种无创、灵敏、可重复的诊断方法，如癌症标志物。迄今为止，口腔癌前标志物主要包括P53、增殖细胞核抗原(PCNA)、Fas、Fasl、内皮素1、p16、bcl-2、ATM、人端粒酶逆转录酶等。此外，周还通过基因芯片技术发现了30多种与口腔白斑相关的可疑癌基因。
研究发现，PCNA、p27和PTEN基因表达的蛋白质都是细胞周期调节蛋白，它们与其他细胞周期调节因子相互作用，共同调节细胞周期，维持正常细胞分裂和增殖的平衡。当PCNA、p27和PTEN基因突变或缺失导致蛋白质表达异常时，细胞周期调节平衡被打破，细胞分裂和增殖异常。因此，在口腔癌前病变和口腔鳞状细胞癌组织中，PCNA、p27和PTEN可能通过类似机制导致口腔癌。加藤等人[3]在口腔鳞状细胞癌的研究中发现，PCNA蛋白在大多数鳞状细胞癌组织中高度表达。临床上，PCNA蛋白高表达的鳞状细胞癌患者易复发，预后不良。陆子正等人[4]也发现正常口腔粘膜中PCNA蛋白染色呈阳性。白斑增生时，PCNA蛋白的阳性表达主要集中在基底层，呈连续分布。随着病变的加重，当白斑伴有上皮发育不良时，PCNA阳性细胞数量增加并延伸至棘细胞表层。口腔鳞状细胞癌中，PCNA阳性细胞主要分布在癌巢周围，而癌巢和角质化珠的阳性比例较少。在p27蛋白的研究中，工藤等[5]采用免疫组织化学方法检测p27蛋白在正常口腔粘膜、单纯口腔粘膜增生和口腔鳞状细胞癌组织中的表达。p27蛋白在正常口腔粘膜和单纯增生组织中高度表达，而p27蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中的表达相对减少。在有淋巴转移的口腔鳞状细胞癌中，p27蛋白表达降低更明显。伴淋巴转移的口腔鳞状细胞癌与原发性口腔鳞状细胞癌p27蛋白表达有显著差异。研究发现，肿瘤的恶性程度越高，p27蛋白表达的下降越明显。在PTEN蛋白表达方面，克里斯蒂安·[6]等研究发现，在口腔鳞状细胞癌中，45.5%的肿瘤整体表达阳性，22.7%的组织部分表达阳性和阴性，而31.8%的病例整体表达阴性。PTEN蛋白在高分化口腔癌中的阳性率为59.1%，而在低分化口腔癌中的阳性率为40.9%。PTEN蛋白的表达与肿瘤分化程度有关，而PTEN蛋白在高侵袭性和恶性程度的病例中不表达。
除了对这三种基因蛋白的表达进行单独研究之外，许多学者还研究了这三种基因蛋白表达之间的相关性。王雪等人[7]发现，PCNA和p27蛋白在正常口腔粘膜和口腔发育不良组织中的表达与口腔鳞状细胞癌中的表达显著不同，PCNA蛋白和p27蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达呈负相关。然而，PCNA蛋白和PTEN蛋白表达之间的相关性已经在身体其他部位的肿瘤中得到更多的研究。胡等人[8]发现PTEN蛋白表达的下调与肝癌组织中PCNA蛋白表达的上调相关。PTEN蛋白和p27蛋白都通过抑制细胞周期蛋白的活性来抑制细胞增殖。马米拉帕利等人[9]发现PTEN蛋白表达显著上调p27蛋白表达，而周传祥等人[10]发现PTEN和p27蛋白在正常口腔粘膜和无上皮发育不良的白斑组织中的阳性表达率为100%。PTEN蛋白和p27蛋白在伴上皮发育不良的白斑中的阳性表达率分别为93.3%和73.3%。PTEN蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中的阳性表达率为71.9%，p27蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中的阳性表达率为40.6%。PTEN蛋白和p27蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达呈正相关。以上研究表明，PCNA、p27和PTEN在口腔癌前病变和鳞状细胞癌的发生发展中起着一定的作用。
口腔癌前病变疑似癌基因的研究可为临床诊断和治疗提供分子基础。口腔粘膜癌前病变是癌症化学预防的合适阶段。许多学者致力于研究和开发治疗癌前病变的药物。中药口服药物主要包括兰琪颗粒和绞股蓝。局部药剂包括视黄酸化合物等。动物实验研究发现，兰琪颗粒和绞股蓝主要通过影响癌基因或抑癌基因相关蛋白的表达而具有抗癌和抗癌作用。周增成[11]应用绞股蓝阻断基韦·乔纳斯·萨利法诱导金黄地鼠颊囊上皮癌变，发现绞股蓝能延缓白斑的发生时间，降低白斑的发生率，显著降低癌变率。免疫组织化学研究发现，绞股蓝治疗组PCNA蛋白和BrdU蛋白阳性细胞比较率明显低于未治疗组。绞股蓝有效降低了PCNA蛋白的表达，从而起到抑制癌症和预防癌症的作用。陈梁左等人[12]开发的兰琪颗粒主要通过在细胞异常增殖阶段下调癌基因表达和上调抑癌基因表达来抑制细胞异常增殖，从而延缓或延缓癌症的进展，降低上皮异常增殖的发生率。然而，它可以通过下调肿瘤组织中表皮生长因子(EGFR)的表达来抑制癌变的发展。在陈梁左等人建立的大鼠舌粘膜癌变模型中，发现PCNA、p27和EGFR的表达水平发生了变化:从正常大鼠口腔粘膜、各级发育不良和鳞状细胞癌，PCNA和EGFR蛋白的阳性表达呈上升趋势，而p27蛋白的阳性表达呈下降趋势。然而，由它开发的兰琪颗粒在作用于大鼠舌粘膜癌变模型时显著改变了这些蛋白的表达。PCNA和EGFR蛋白在非药物组大鼠异常增生舌组织中的表达高于兰琪颗粒干预组，而p27蛋白在非药物组中的表达明显低于兰琪颗粒干预组，表明兰琪颗粒具有增强机体抵抗力、固本抑癌的作用。因此，本实验通过研究细胞周期调控相关基因的突变和表达变化，比较了PCNA、p27和PTEN在正常人口腔粘膜、癌前病变、口腔鳞状细胞癌和正常大鼠舌粘膜、发育异常和鳞状细胞癌中的表达，探讨了这些基因的异同机制和蛋白表达变化的分子机制，为临床监测癌前病变和癌变提供了分子基础。 也为更好的临床治疗癌前病变和预防癌变提供了依据，也为兰琪颗粒的临床应用提供了依据。

[目录/br/]二，前言....................................................................5
三，材料和方法........................................................8[/br/ ] (1)实验材料........................................................8
(2)实验方法..........................................................10
4，实验结果...........................................13
(1)人类实验结果..........................................13
(2)大鼠实验结果.............................................31
五.讨论............................................................41
(1) PCNA，P27，……41
(2)...................42

结论在大鼠癌变模型中，采用免疫组织化学二步法检测10例正常口腔粘膜、15例单纯性增生性白斑、10例非典型增生性白斑、20例口腔鳞状细胞癌组织中的PCNA，检测p27蛋白和PTEN蛋白的表达，检测10例正常口腔粘膜、10例单纯性增生性粘膜、15例非典型增生性粘膜和15例口腔鳞状细胞癌中PCNA蛋白和p27蛋白的表达。
实验结果表明，从口腔癌前病变到口腔鳞状细胞癌组织，PCNA蛋白的表达呈逐渐上升趋势，统计分析表明，单纯增生性白斑、口腔白斑非典型增生、口腔鳞状细胞癌中蛋白表达差异具有统计学意义，表明PCNA蛋白在口腔粘膜癌变过程中对细胞增殖具有积极调节的超功能，从而加速细胞增殖，最终导致无限细胞增殖和肿瘤发生。然而，p27和PTEN蛋白在口腔单纯性增生性白斑、口腔白斑非典型增生和口腔鳞状细胞癌组织中的表达呈逐渐下降趋势。统计分析表明，p27和PTEN蛋白对细胞增殖的负调节功能在口腔癌的口腔癌前病变发生过程中受到抑制或代偿失调，不能有效抑制细胞增殖，从而促进癌前病变向癌症的转化和发展。

参考
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