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淋巴细胞免疫治疗技术的流程、疗效及安全性分析,分离的淋巴细胞可以用于哪些细胞免疫技术

淋巴细胞免疫治疗技术的流程、疗效及安全性分析

分离的淋巴细胞可用于引入细胞免疫技术。不明原因的反复自然流产占习惯性流产的50% ~ 70%。在不明原因的反复自然流产中,夫妻免疫因素引起的阻断抗体(APCA)缺乏是主要原因。对免疫习惯性流产患者,用丈夫或其他人的淋巴细胞进行同样的致敏治疗,观察淋巴结细度。

淋巴细胞免疫治疗后有什么反应

细胞免疫疗法没有任何特殊反应。病人治疗后可能会发烧。一般来说,在中国不建议不吃细胞免疫疗法。基本上,这是假的。建议在国外做,例如在台湾。成本与中国相同,但效果是中国的十倍以上,主要是因为细胞靶向培养更准确。因此,效果很好。具体来说,香港可以被要求是安全和健康的。对于体外培养14天的2000个细胞,希望每天5,000,000,000元的疗程需要7-8个疗程。

分离的淋巴细胞可以用于哪些细胞免疫技术

分离的淋巴细胞可用于引入细胞免疫技术。不明原因的反复自然流产占习惯性流产的50% ~ 70%。在不明原因的反复自然流产中,夫妻免疫因素引起的阻断抗体(APCA)缺乏是主要原因。对免疫习惯性流产患者,用丈夫或其他人的淋巴细胞进行同样的致敏治疗,观察淋巴结细度。

淋巴细胞免疫治疗后有什么反应

淋巴细胞免疫治疗技术的流程、疗效及安全性分析范文

随着生殖免疫学研究的发展,越来越多的研究结果表明不明原因反复自然流产(URSA)与母胎免疫调节障碍有关。19世纪50年代,比灵汉等人[1]首先认为,胎儿作为半同种异体移植物,具有不被母亲免疫排斥的能力,但当母胎界面的免疫耐受机制异常或受阻时,胎儿会被母亲体液免疫反应排斥并流产。鉴于这一理论,人们开始致力于生殖粘膜免疫问题的研究,认为母亲体液免疫反应是影响妊娠延续和成功的重要因素。阎正等人[2]研究结果表明,URSA患者与其配偶之间人类白细胞抗原相容性的增加导致母体对胎儿的免疫识别异常,并且不能产生保护性抗体阻断抗体(BA),即抗父系白细胞抗体(APLA),结果,孕妇在怀孕期间对来自胎儿父系的同种抗原表现出低免疫应答或低免疫识别,从而不能产生足够的BA来保护胎儿免受母体免疫排斥并最终流产。基于上述理论,国内外学者认为:

缺乏学士学位是熊座的一个重要原因。淋巴细胞免疫治疗技术可以通过对异基因抗原(淋巴细胞)的免疫反应,刺激患者产生足够的BA,调节一系列免疫因子,抑制母胎细胞免疫排斥反应,从而预防胎儿免疫排斥,使妊娠成功。

淋巴细胞免疫疗法和URSA。

复发性自然流产是指同一个伴侣自然流产2次以上,发生率为1%~5%。RSA患者通常被定义为URSA或原发性复发性流产,如果病因筛查后未发现异常,包括患者生殖器官解剖、夫妇染色体检查、内分泌指标和感染性病因筛查,发病率高达50%~60%[3]。[研究4]表明:

BA缺乏是URSA的一个重要原因。怀孕是一个成功的半同质移植过程。由于自身的免疫系统,孕妇会发生一系列适应性变化,表现出对子宫内胚胎移植的免疫耐受而不会发生排斥反应。在母体血清中,有一种或几种阻断因子可以抑制免疫识别和免疫反应,即BA。BA,通过结合母体反应性淋巴细胞或结合抗原来达到阻断细胞免疫反应的目的,从而使妊娠得以继续。如果URSA患者缺乏抗配偶CD3+、CD4+、CD8+抗原的BA,母体对胎儿的免疫损害将高于对胎儿的免疫保护,导致胎儿因母体免疫攻击而被排斥和流产。

1981年,泰勒等人[5]基于当时对URSA患者发病机制的研究,认为URSA患者体内缺乏BA。因此,他们首次大胆使用来自父母或无关第三方的外周血淋巴细胞对4例患有ba(即APLA阴性)的URSA患者进行淋巴细胞免疫治疗。经过治疗,其中3人怀孕并成功分娩。

泰勒利用淋巴细胞免疫疗法人工强化妊娠的免疫维持机制,抑制母亲和胎儿之间的免疫排斥,使妊娠成功。

1993年,林启德教授等人在中国6]首次报道了淋巴细胞免疫治疗技术的发展,并取得了87%的成功率。国内文献[7]也报道说,URSA患者淋巴细胞免疫治疗后的存活率达到75%。这证明淋巴细胞免疫疗法能提高熊去氧胆酸患者的免疫反应性,使其获得BA,防止胎儿父系抗原被母体免疫系统识别和杀死。从那时起,淋巴细胞免疫治疗技术治疗URSA的方法在世界范围内得到了广泛的应用,并在世界范围内应用了20多年。

淋巴细胞免疫疗法的原理。

淋巴细胞免疫治疗技术基于Faulk等人提出的滋养层淋巴细胞交叉反应抗原(TLX)免疫保护理论,该理论认为胎儿逃避母体体液免疫排斥的机制主要与滋养层膜抗原有关,妊娠的发生和延续必须依赖母体对TLX的认识和免疫反应。妊娠的成功是母胎免疫耐受的过程。妊娠免疫耐受的机制主要表现在滋养层膜抗原-人白细胞抗原表达上调、CD56+CD16-自然杀伤细胞亚群占优势、Th1/Th2细胞因子免疫应答失衡和Th2细胞因子水平升高。这些滋养层抗原可提高保护性抗体-BA在母胎界面的表达水平,共刺激(CD18/CD86)占优势,可抑制母免疫细胞对滋养层细胞的细胞毒性作用,保护滋养层细胞免受免疫攻击。如果孕妇在怀孕期间由于某些环节的异常或障碍而不能产生足够量的BA,宫内胎儿将遭受免疫攻击和流产。韩兰等人[8]发现淋巴细胞免疫疗法可以诱导妊娠免疫耐受,上调辅助性T淋巴细胞Th2细胞因子il4水平,下调Th1细胞因子,增加血液中CD4+和CD25+T淋巴细胞水平,发挥免疫抑制作用,诱导母亲产生足够量的BA,从而保护胎儿免受母亲排斥,使妊娠成功。华月琴等[9]的研究也发现:

URSA患者血清Th1型细胞因子占优势。通过淋巴细胞免疫治疗,Th1型细胞因子可以下调,Th2型细胞因子可以上调,Th1/Th2型细胞因子之间的平衡可以改变,Th2型细胞因子的免疫应答可以增强。因此,通过异基因抗原(外周血淋巴细胞)的免疫反应,可以促使患者产生BA,并且可以抑制母亲和胎儿之间的细胞免疫,从而使妊娠能够再次成功。杜欢庆等人[10]也证实,巴能够通过与母体反应性淋巴细胞结合或直接与相应抗原结合来阻断免疫反应。URSA患者丈夫或无关第三方外周血淋巴细胞皮内或皮下注射,可刺激患者体内产生相应的ba,提高BA水平,同时改变免疫细胞亚群的组成比例,促进Th1型细胞因子向Th2型细胞因子的转化,从而保护胚胎免受母体体液免疫排斥引起的流产,实现70%~90%的再妊娠成功率。

3.淋巴细胞免疫治疗技术的主要流程。

3.1 URSA患者妇科筛查排除先天性发育异常和妇科器质性疾病,检测夫妻染色体核型分析正常,性激素、甲状腺功能空腹部血糖和黄体功能正常,抗核抗体、反复流产抗体系列(抗心磷脂抗体、抗子宫内膜抗体、抗卵巢抗体、抗精子抗体、抗透明带抗体、抗绒毛膜促性腺激素抗体)阴性,优生四项(TORCH)阴性,阻断抗体阴性,排除其他原因,为治疗前,双方必须签署知情同意书。

3.2免疫原供体的选择。

如果血液检测不包括乙型肝炎、丙型肝炎和TORCH感染、快速血浆反应(RPR)和艾滋病毒检测为阴性,患者的丈夫或不相关的第三人可用作淋巴细胞的目标。健康丈夫的外周血淋巴细胞优选作为免疫原供体。如果丈夫不适合作为免疫原供体,健康的第三方淋巴细胞被选为免疫原供体。[的一些研究表明,来自丈夫或不相关的第三个人的淋巴细胞和来自男性或女性的第三个人的淋巴细胞之间的治疗效果没有统计学差异。

3.3外周血淋巴细胞抽取30~400gml供体空腹肘静脉血用肝素抗凝。充分混合后,将抗凝剂以15cm的比例小心加入人外周血淋巴细胞分离液(天津浩阳生物制品技术有限公司)的液面,无菌巴斯德氏菌吸管收集的第二层细胞放入含有4-5ml注射用生理盐水的离心管中,充分混合均匀后,离心400g 10分钟,沉淀物重复洗涤两次,然后用0.8-1.0ml注射用生理盐水稀释定容,得到所需的淋巴细胞悬浮液。

3.4注射方法主要是双侧前臂皮内注射。收集的淋巴细胞悬浮液约为0.8-1.0毫升,活细胞数为(60-100)×106/毫升。在患者前臂两侧皮肤内注射5-6点,第一次注射后观察30分钟。每2周重复一次,疗程为3次,治疗时间应避免经期。疗程后两周,再次检查阻断抗体,并鼓励阳性者在3个月内怀孕。如果获得妊娠,免疫治疗将再次进行2-3次,直到妊娠超过3个月。如果治疗5次后阻断抗体为阴性,患者可在复查前继续治疗2-3次。

3.5注意事项①技术操作中使用的实验材料应为无毒、无尘、无菌一次性耗材。严格执行无菌操作,避免感染。②积极预防和及时治疗过敏反应,结合妊娠早期黄体支持治疗(绒毛膜促性腺激素和非合成孕酮),应重视妊娠早期患者的心理和心理调节。(3)告知患者该技术的流程和技术风险:是否存在当前医学无法预测的血源性传染病风险。(4)告知患者,如果需要重复治疗超过6个月,他/她的免疫原供体需要再次进行血液检测,并且只有当甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、弹性蛋白反应蛋白和艾滋病毒均为阴性时,才能重新开始血液供应。

淋巴细胞免疫治疗的临床效果

4.1 URSA患者的治疗效果根据国内文献《[12~13》,采用淋巴细胞免疫治疗技术治疗后,URSA患者的再妊娠成功率可达70% ~ 90%。熊座患者体内缺乏学士学位。用来自丈夫或不相关的第三方的淋巴细胞进行治疗可以有效地刺激母亲产生足够量的BA并提高BA功能的活性。通过调节母亲的细胞和体液免疫功能,母亲可以对胎儿产生免疫耐受并呈现封闭状态,从而提高妊娠成功率。

4.2体外受精-胚胎移植对反复自然流产患者的影响在体外受精-胚胎移植过程中,胚胎是母亲的半同种异体移植物。其优质胚胎能否在子宫内生长发育,除了胚胎质量和子宫内膜容受性外,还与母胎界面滋养层和蜕膜免疫细胞之间的免疫失衡有关。张炎等人[14]的研究发现,对于体外受精和胚胎移植后反复自然流产的患者,如果其BA为阴性,则应用淋巴细胞免疫疗法,治疗后妊娠成功率达到60%。

4.3影响治疗成功率的关键因素包括:①开始时间、间隔时间、频率、疗程等。治疗的目的应是及时将患者的BA转换为Yang(2)注射淋巴细胞密度:(60~120)×106细胞/ml,一定的淋巴细胞密度是保证BA及时向阳转化并获得满意疗效的保证;③孕妇年龄和重复流产次数是影响治疗效果的因素之一。④注射部位皮肤反应的严重程度可作为判断免疫治疗效果的有效观察指标之一。首次注射后24~48h,皮肤局部出现直径为3~10mm的红色硬结,多次注射后皮肤反应逐渐减弱,表明治疗效果良好。

淋巴细胞免疫治疗的安全性综述

迄今为止,淋巴细胞主动免疫治疗技术已经在世界范围内应用了20多年。其主要副作用是血源性传染病(如肝脏炎症、艾滋病等)。)、输血反应、过敏反应、移植物抗宿主反应等。[15]。关于治疗对产妇免疫功能和传染病的影响,到目前为止,还没有关于易感染和恶性肿瘤的报告,[16]。关于后代的影响,林启德等人[[17]经过10多年的观察,母亲和后代没有明显的主动免疫不良反应。主动免疫的后代在出生体重、体格发育和智力(包括个体-社会、语言、良好的运动适应性和大运动量)方面与同龄儿童没有显著差异。这表明淋巴细胞免疫治疗是一种安全、有效、简便、经济、可行的治疗URSA的方法。

淋巴细胞免疫治疗技术展望

据统计,不同地区、不同班级、不同年龄的URSA发病率约为15%~40%,其中妊娠12周的URSA约占62%。由于URSA的发生难以预测,实际发病率可能会更高。由于反复流产给患者及其家人带来了许多生理和心理问题,URSA已成为危害女性生殖健康的重要原因。

URSA发病机制复杂,涉及遗传学、免疫学、解剖学、内分泌学、感染和许多其他因素。在现代技术诊断中,40%~80%的患者不明原因流产,临床治疗效果不佳,这是目前生殖医学亟待解决的问题。自从泰勒等人在1981年建立淋巴细胞免疫疗法在熊座中的应用以来,这种方法已经被世界上许多中心采用。近年来,国内许多中心也开始探索健康丈夫或健康无关的第三方外周血淋巴细胞对URSA患者的免疫治疗,并取得了良好的临床治疗效果。该技术的临床应用可明显改善患者机体的免疫状态,有效提高患者的免疫反应性,降低流产率,提高再妊娠成功率,疗效确切,方法简便,可减轻患者流产的痛苦,降低治疗经济成本,对患者及生育后代无影响。因此,淋巴细胞免疫治疗目前是体外受精和胚胎移植过程中治疗尿白蛋白和胚胎流产患者的有效方法。

参考:

[1]比灵汉姆雷,布伦特·莱,梅达瓦尔·巴布。积极获得外源细胞的耐受性[。自然,1953,172(4379):603-606。

[2]阎正,何于婷,何倩东,等.人类白细胞抗原基因多肽与不明原因复发性流产免疫治疗的妊娠结局[.《生殖与避孕》,2010年,30 (3): 174-176页。

[3]王晓燕,荆俊宁,王文迪,等.不明原因复发性流产淋巴细胞免疫治疗妊娠结局分析[.兰州大学学报:医学版,2013,39 (1): 30-32。