论文范文丹皮酚对大鼠肝癌前病变的预防作用及其药代动力学

第一章中医药防治肝癌前病变的研究进展

1.1国内外研究现状

肝癌是世界十大常见肿瘤之一，尤其是肝细胞癌，占原发性肝癌的95%，是死亡率最高的最常见恶性并发肿瘤之一。它具有发病隐匿、恶性度高、进展快、侵袭力强、易转移、复发率高、预后差的特点。肝细胞癌是世界上常见的恶性肿瘤之一，在我国发病率居第二位。中国每年有11万人死于肝癌，占世界肝癌总死亡率的45%。肝癌是高度恶性的，被誉为“癌症之王”。由于它发生在肝脏，体积巨大，代偿功能极强，很难用过去常用的常规检查方法在早期发现。一旦发现，也往往是肝癌的中晚期，因此肝癌患者的生存期非常短。

半个世纪以来，分子生物学、病毒学和免疫学等基础研究已经渗透到肝癌领域，肝癌治疗的研究也取得了一些进展。目前，主要的治疗方法有肝移植、外科治疗、化疗、放疗、消融等。“中医药作为我国防治疾病的传统武器，因其具有多燥、多效、不良反应少、提高机体免疫力、不宜产生耐药性等优点，在脾脏肿瘤的治疗中发挥着重要作用。

1.2病因和发病机制

中医文献中没有“肝癌”的病名，但根据其临床表现，可将其分为“疑病症疼痛”、“积聚”、“黄而直”和“气胀”——一般认为其发生是由正气不足、脏腑功能失调、气滞血瘀、痰凝有毒积聚所致。总的来说，病因病机是本虚标实，脾虚为本，气滞血瘀，湿热毒邪为本。它可分为四种类型:气滞血瘀、肝胆湿热、脾胃虚弱、肝肾阴虚。从慢性肝病的临床演变来看，气滞血瘀、脾功能不全贯穿始终，表现为湿热蕴结、流行气厚薄不同的轻重缓急的临床表现。

肝癌是一种由作用于身体的各种病因引起的疾病。常见病因包括病毒、黄曲霉毒素、寄生虫、化学毒物、酒精、水污染、遗传易感性等。目前认为其发病机理是正常肝细胞在各种致癌因素的长期作用下，加上遗传易感性，导致肝细胞遗传特征的改变。这种变化的积累将导致肝的癌前病变，并发展成早期癌症，然后发展成浸润性癌症。

第二章牡丹醋的药理作用和药代动力学

2.1牡丹酸的药理作用

牡丹酸是中药牡丹皮的主要活性成分，也称为牡丹酸，是毛茛科植物牡丹(樟科植物徐长卿的根皮和干燥根或全草)和毛茛科植物勾兑根的主要活性成分。Pae是一种小分子酸性化合物，白色针状晶体，熔点低(51±1℃)，易挥发，水溶性差。其分子量为166.18，分子式为C9H10O3，化学结构为2-羟基-4-甲氧基苯乙酮。研究表明，牡丹皮具有抗肿瘤、抗菌、增强免疫力、降血压、促进微循环等药理作用。“只有牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮

茅台酒曲是一种抗氧化剂制动器，通过抑制细胞中活性氧的产生和脂质过氧化，可以直接清除氧自由基，抑制NF-KB及相关的活化，从而抑制细胞增殖。谢云峰等研究人员发现，牡丹皮注射液、柴胡注射液、当归注射液、天麻注射液和夏天无注射液的清除率在雕刻量范围内呈浓度依赖性，其中牡丹皮注射液的清除率最强。安息香是一种典型的强环境致癌物质，其代谢产物9，10-二氢-二氢-二氢和二氢-自由基也具有很强的致癌性。然而，侯傅生等研究发现，牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮牡丹皮

2.2免疫增强

牡丹皮牡丹皮酒能增强特异性体液免疫功能、特异性细胞免疫功能和非特异性免疫功能。白细胞介素-2可通过调节机体免疫系统发挥抗脾肿瘤的作用，而肿瘤坏死因子-a具有直接抑制和杀伤肺肿瘤细胞的作用，可诱导脾肿瘤细胞凋亡。李坤真等人的研究发现，牡丹皮能够刺激大量细胞的活化和增殖，增殖大量脾基质细胞，增加免疫器官的重量，增强巨杰细胞分泌白细胞介素-1、白细胞介素-2和肿瘤坏死因子等细胞因子的活性，增强自然杀伤细胞的细胞毒性。表明牡丹皮能增强小白军的非特异性免疫功能，增强小鼠的体液免疫功能。

早期实验表明，在非特异性免疫功能方面，注射低浓度的牡丹酸可促进中性粒细胞的非特异性唾液吞咽和细菌清除功能。牡丹皮粉雾化吸入可显著改善大鼠肺的全身细胞和体液免疫功能及局部非特异性免疫功能。通过研究丹皮酚对小气道淋巴细胞转化的影响，发现丹皮酸还能增强小鼠的特异性免疫功能。Pae的抗肿瘤作用可能与增强细胞免疫功能、促进白细胞介素-2和肿瘤坏死因子-α的产生有关

第三部分肝癌前病变模型的建立............................29

1.材料和方法................................29

2.结果.............................................31

3.讨论.............................................36

第四部分丹皮酚对大鼠肝癌甜蜜病变的预防............................39

1.材料和方法................................39

2.结果.............................................46

3讨论.............................................52

第五部分丹皮酚在肝癌前病变大鼠体内的药代动力学……54

一、丹皮酚在肝癌全景病变大鼠模型中的药代动力学……54

1.材料和方法............................57

2.结果.............................................58

丹皮酚在肝癌前病变大鼠体内的组织分布……64

1.材料和方法............................64

2.结果.............................................66

丹皮酚诱发肝癌前病变大鼠雌激素硫酸转移酶的变化......69

1.材料和方法............................69

2.结果.............................................70

四.讨论.........................................73

第六部分探讨牡丹皮酸在肝癌前病变大鼠体内的药代动力学变化机制。

根据牡丹皮酸及其代谢物的化学结构(如下图所示)，其代谢物结构含有SO4-，SO4-可由琉球酸化反应产生，与雌激素代谢相似。代谢过程可能在琉球酸转移酶的作用下，通过碗酸化反应，结合牡丹皮结构的羟基位置生成代谢物。

结论

在前人实验的基础上，建立了肝脏癌前病变的大模型，研究了丹皮对肝脏癌前病变的预防作用和药代动力学变化。

牡丹皮酸对大鼠肝脏癌前病变的实验结果表明，牡丹皮酸能明显改善大鼠肝脏癌前病变的总体情况，逆转其肝脏病理变化，提高生化和形态计量学相关指标，降低AFPmRNA表达，提示牡丹皮酸对诱发DEN干癌前病变有一定的预防作用。

建立了UPLC法测定大鼠血浆和组织中牡丹皮酸的浓度。牡丹皮酸在大鼠肝癌前病变模型不同发育阶段的药代动力学研究证实，牡丹皮酸在肝癌前病变模型不同发育阶段的药代动力学结果存在一定差异。通过对照组和肝癌前病变大鼠的牡丹皮酸组织分布，可以看出牡丹皮酸主要分布在肝脏和肾脏，其他组织也有分布病变。雌激素琉球酸在肝脏的表达减少，在肾脏的表达增加，丹皮酸的排泄减少可能是影响参数变化的主要原因。雌激素硫酸转移酶在诱导的大鼠肝癌前病变模型中也首次在内皮细胞中发现表达。雌激素硫酸转移酶在内皮细胞中的表达逐渐增加，从而增加牡丹皮酸进入肝细胞的量，可以更好地起到预防作用。

参考文献(省略)