论文范文小鼠胚胎心肌细胞三磷酸腺苷敏感性钾通道的发育依赖性
论文类型：论文范文
论文字数：
论点：细胞,心肌,发育
论文概述：
探讨小鼠胚胎心肌细胞ATP依赖性钾通道(KATP)随着胚胎的发育在心肌细胞上的表达、电生理学特点及其功能的变化
论文正文：
小鼠胚胎心肌细胞三磷酸腺苷敏感性钾通道的发育依赖性
[[摘要]目的:探讨三磷酸腺苷依赖性钾通道在胚胎发育小鼠胚胎心肌细胞中的表达、电生理特征及功能变化。方法:分离第10.5天和第17.5天的小鼠胚胎，用胶原酶B消化，获得单个胚胎心肌细胞，培养24-36h。以吡那地尔和克罗卡林为KATP通道的特异性开放剂，以格列本脲为KATP通道的特异性抑制剂，用电流钳模式记录细胞动作电位，观察IKTP功能的发育依赖性变化。采用全细胞电压钳模式(细胞外液K+浓度为140毫米，钳电位为0毫伏，测试脉冲为-100至+40毫伏，阶跃为20毫伏，持续时间为500毫秒)，记录心肌细胞KATP电流(IKTP)，观察电生理特性随发育的变化。逆转录聚合酶链反应用于分析KATP亚基Kir6.1和Kir6.2的发育依赖性变化以及调节亚基SUR1和SUR2A在早期和晚期心肌细胞中的表达。结果:目前的钳夹数据显示，IKATP特异性开放剂匹那地尔在早期缩短了大多数心房和心室肌的动作电位持续时间，对动作电位的最大舒张电位没有影响。然而，晚期胚胎心肌细胞动作电位的膜电位是超极化的。电压钳数据显示，早期和晚期胚胎心肌细胞的IKTP电流密度无显著差异，但早期心肌细胞的IKTP内向整流特性明显强于晚期心肌细胞。Kir6.1、Kir6.2、SUR1和SUR2的基因水平随发育呈上升趋势，Kir6.2和SUR2在发育后期占优势。结论:随着小鼠胚胎的发育，心肌细胞KATP通道亚单位的表达呈发育依赖性增加，但电流密度无明显变化，KATP通道的内向整流特性降低。IKATP的电生理特性和分子生物学水平表达的差异可能是由于通道亚单位的不同组合，或者是由于蛋白质翻译水平的差异。【摘要】目的:三磷酸腺苷敏感性钾离子通道(KATP)可能参与胚胎心肌细胞的耐缺氧性，因此我们旨在研究KATP在小鼠胚胎心肌细胞中的发育变化，包括其电生理特征和功能贡献。方法:将10.5天和17.5天的小鼠胚胎分别作为早期和晚期发育阶段。用胶原酶B酶促分离单个小鼠胚胎心肌细胞，并在电生理记录前培养24-36小时。KATP通道Pinacidil和Cromakalim的特异性开放子以及特异性抑制剂格列本脲用于鉴定IKATP。用电流钳记录动作电位，观察其在发育过程中的功能贡献，用全细胞电压钳(细胞外钾+ 140 mM，保持电位0mV，测试脉冲-100 ~ 40mV，步长20mV，持续时间500ms)研究其电生理特性。最后，进行逆转录聚合酶链反应，研究KATP亚基Kir6.1、Kir6.2和调节亚基SUR1、SUR2A的表达水平。结果:动作电位记录数据显示，特异性开放剂匹那地尔缩短了大多数工作心肌细胞的动作电位持续时间，而对最大舒张电位无影响(MDP)。然而，它强烈超极化低密度脂蛋白工作心肌细胞的MDP。全细胞记录显示EDS和LDS胎儿心肌细胞间的IKATP电流密度无显著差异，但Kir6.1、Kir6.2、SUR1和SUR2在基因水平上的表达均随发育而增加。此外，EDS心肌细胞的IKATP内向整流特性强于LDS细胞。结论:随着成熟，KATP通道亚单位表达上调，电流密度无明显变化，但KATP通道内向整流特性降低。IK三磷酸腺苷电生理特性和分子表达水平的冲突可能源于每个亚单位的不同组合，或者蛋白质翻译的不同水平。
[关键词]胚胎心肌细胞；KATP全细胞膜片钳；发展；【关键词】[/br/】胚胎心肌细胞；KATP全细胞膜片钳；发展；
小鼠胚胎心肌细胞三磷酸腺苷敏感性钾通道发育依赖性的研究
[目录]中文摘要5-6
英文摘要6-7
前言8-11
材料和方法11-18
结果18-21
讨论21-23
结论23-24
图24-30
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