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36400字硕士毕业论文药效学论文范文:防风的组织培养和生化分析

论文类型:硕士毕业论文
论文字数:36400字
论点:培养,组织,植物
论文概述:

培养条件与玻璃化:外源激素、琼脂浓度和光强对其组织培养过程中的玻璃化苗产生的影响明显。细胞分裂素 6-BA 的浓度过高、琼脂浓度过低、弱光照强度极易导致防风试管苗玻璃化。

论文正文:

简介

伞形科药用动物包括防风、柴胡、当归、川芎、北沙参、明党参、白芷等。它含有许多生化成分,可以治疗一些疾病。获取伞形科中草药的传统方法是收集和挖掘家畜原料来源。然而,由于自我挖掘,不仅国内资源日益增加,而且自然世界的生态平衡也受到极大破坏。人工种植还面临道德进化、杀虫剂净化和种子疾病。此外,人工种植药材中活性成分的种类和数量往往因地区和天气而异,给品德控制带来许多困难。因此,积极研究伞形科药用活性物质资源的再生和种质保存技术,使有限的资源可供人类可持续利用,迫在眉睫。
植物组织培养是一门基于动物生理学的新生生物技术学科。根据动物的不同数据,可分为愈伤组织培养、悬浮细胞培养、器官培养、茎尖分生组织培养和原生质体培养。该技术已广泛应用于动物快速繁殖、品种改良、基因工程、种质资源保存、次生代谢产物消耗等方面,对现代农业和医学产生了深远影响。
1.1植物组织培养概述
德国科学家施莱登和施万从1838年到1839年提出细胞理论,认为细胞(尤其是植物)是生理和发育中具有潜在全能性的功能单位。1902年,德国科学家哈贝兰德(Haberlandt)根据细胞理论提出高等植物的器官和组织可以连续分裂成单个细胞,这是一个具有潜在全能性的功能单位,即植物细胞具有全能性(Zeng洪雪等人,2004)。1934年,怀特通过番茄根尖的组织培养建立了第一条活跃生长的无性繁殖系(陈海卫,2007),获得了离体生根培养的成功,并建立了组织培养的综合培养基。[/BR/]20世纪30年代和50年代,影响体外培养材料生长发育的一些重要物质的发现,如天然提取物、维生素B、生长素、细胞分裂素等。(王迪,2004)促进了植物培养研究的快速发展,特别是建立了细胞分裂素与生长素比例控制器官分化的激素模型(程家生,2003),使得植物组织培养技术和理论体系得以形成。自20世纪60年代以来,由于组织培养技术的成熟和完善,世界范围内植物组织培养的研究和工业应用进入了快速发展阶段。关于茎尖(器官)培养、花药培养、胚培养、愈伤组织培养、原生质体培养、细胞融合和外源基因导入的报道很多。目前,有130个科和近1,500种植物利用组织培养再生植物,其中一些已发展成为工业生产的商业产品。伞形科药用植物组织培养的研究可以追溯到20世纪70年代。1976年,富田对DC柴胡进行液体培养。诱导DC柴胡愈伤组织细胞分化为根,并从根中获得柴胡皂苷(Tomita Y等人,1976)。张世玉等人(1982)研究了当归愈伤组织诱导和植株再生。郝建平等(1995)对柴胡愈伤组织细胞进行了细胞悬浮培养和固定化培养,发现悬浮培养的培养物的生长率比固定化培养高10倍。
到目前为止,伞形科药用植物的组织培养取得了很大进展,不仅产生了大量优秀的克隆,获得了人类所需的多种代谢物质;单倍体、三倍体和非整倍体也可用于培育新的植物品种和提高种子质量。组织培养的植物细胞也已成为细胞水平分析和研究的理想材料。

1.2组织培养技术在伞形科药用植物中的应用
1.2.1植物的快速繁殖和无病毒生产
植物的快速繁殖是一种通过体外培养快速繁殖植物的技术,主要应用于不能用其他方法繁殖或繁殖效率低的植物的繁殖。为了保持品种基因型稳定,避免有性繁殖过程中的变异,还采用了植物快速繁殖技术。用于快速繁殖的植物材料主要是茎尖、茎段、叶、胚等。快速繁殖技术易于掌握,繁殖率高。组织培养技术可用于繁殖一些种子不能繁殖的低繁殖系数药用植物,具有重要意义。经过几十年的努力,许多珍贵的植物已经被体外培养以获得再生植株(张慧颖等人,2010年;彭金焕等人,2010年;杜·华敏等人,2008年;牟晓玲等人,2010)。一些伞形科药用植物也通过组织培养快速繁殖(见表1)。伞形科相关植物包括柴胡、明党参、当归等。植物病毒病是农作物的重要病害之一。当植物被病毒感染时,通常会造成损害,如生长缓慢、质量下降和产量大幅下降。
在植物中,病毒主要通过维管束组织运输和传播。茎尖的新分生组织没有维管束分化,难以到达。因此,病毒含量很低,甚至不存在。在较老的组织中,病毒数量随着距茎尖的距离而增加,采用组织培养方法。茎尖培养可以降低再生植株的病毒含量,连续进行几代培养,甚至可以获得无病毒植株。然后将无病毒植物用于繁殖,然后种植的作物将不会或很少会有病毒。利用组织培养进行植物的快速繁殖和脱毒种苗生产,不仅可以取得显著的经济效益,而且可以拯救珍稀濒危物种,有助于解决药用植物野生资源缺乏造成的短缺问题。

目录
2材料和方法....................................................................20
2.1测试材料............................................................20
2.1.1测试材料............................................................20
2.1.2主要药物、试剂和仪器...........................................20
3结果和分析.......................................................................26
3.1灭菌时间对外植体灭菌效果的比较.........................................26
3.2基础培养基和激素配比对愈伤组织诱导的影响..............................26
3.3愈伤组织分化成苗再生体系的建立...........................................27
3.3.1愈伤组织诱导........................................................27
4讨论.........................................................................36
4.1不同介质对........................................................36
4.2不同外植体的效应........................................................36

结论
以防风不同组织为外植体,通过愈伤组织诱导和分化,建立了防风再生体系。获得了以下结果。
1。试管苗的RAPD分析:RAPD分析了从相同茎段和对照的愈伤组织分化培养的15个生长良好的试管苗。200个随机引物之一(S4)在植物6中扩增出大小为640bp的稳定多态性片段。结果表明,组织培养能很好地保持防风的遗传特性,但同时也可能导致脱氧核糖核酸分子的变化和遗传变异。
2。培养条件和玻璃化:外源激素、琼脂浓度和光照强度对组培玻璃化苗有明显影响。细胞分裂素6-BA浓度过高,琼脂浓度过低,光照强度过低,容易导致防风试管苗玻璃化。[/比尔/] 3。玻璃苗和正常苗的过氧化物酶同工酶:结果表明,玻璃苗比正常苗活性高的Rf0.150、Rf0.179和Rf0.300条带较少,但Rf0.140、Rf0.147、Rf0.156、Rf0.182四个条带和两个活性较高的次级条带较多,同样为Rf0.688条带。原因如下:首先,一个结构基因可能受多个启动子调控,玻璃化导致结构基因的非特异性表达;其次,有可能其他基因已经被激活,正常的新陈代谢已经改变,导致更频繁的条带。

参考
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