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辅助快速冷冻诊断中改良Feulgen染色的运用,影响脱氧核糖核酸费尔根染色的因素

辅助快速冷冻诊断中改良Feulgen染色的运用

影响脱氧核糖核酸1弗氏染色的因素。费尔根反应的染色深度与水解过程中的材料、温度和时间有关。水解时间的长短应根据固定液和材料选择。如果时间太短,游离醛基的量很少,染色不深。如果时间过长,醛基会进一步变成其他物质,染色不深。水解过程中的温度应严格控制。2.不水解的

辅助快速冷冻诊断中改良Feulgen染色的运用

Feulgen染色的原理介绍

自1924年费尔根等人建立了脱氧核糖核酸-费尔根染色法以来,这种方法仍然是脱氧核糖核酸定量测定的主要染色方法之一。费尔根染色是显示脱氧核糖核酸的经典方法。该方法要求新鲜组织用卡那尼溶液固定效果最好,其次是酒精-甲醛溶液,单独用甲醛固定效果不理想。由于氟,盐酸可以改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,分离染色质中的脱氧核糖核酸和蛋白质,这有利于弱酸结合染色剂进行脱氧核糖核酸水解。 为什么费尔根不能染色日本晚樱桃、蔷薇科樱桃、落叶树、一些常绿灌木、银灰色树皮、唇形皮孔、椭圆形叶子、长方形到倒卵形的线粒体dna 日本有悠久的种植历史。园艺品种繁多,被誉为日本的国花。 它主要由这个物种及其变种组成,

影响脱氧核糖核酸费尔根染色的因素

影响脱氧核糖核酸1弗氏染色的因素。费尔根反应的染色深度与水解过程中的材料、温度和时间有关。水解时间的长短应根据固定液和材料选择。如果时间太短,游离醛基的量很少,染色不深。如果时间过长,醛基会进一步变成其他物质,染色不深。水解过程中的温度应严格控制。2.不水解的

辅助快速冷冻诊断中改良Feulgen染色的运用

Feulgen染色的原理介绍

辅助快速冷冻诊断中改良Feulgen染色的运用范文

摘要

快速冷冻是目前病理术中快速诊断应用最广泛的方法之一,但由于冷冻易造成组织细胞的变形、不易做连续切片、不易切成薄片,故冷冻诊断风险性很大。传统的 Feulgen 染色[1]及改良 Feulgen 染色[2]时间长,不适合辅助冷冻快速诊断。本研究使用专业的医疗设备对新鲜组织印片进行Feulgen 染色后,利用全自动 DNA 图像分析系统判定结果,探讨该技术在辅助快速冷冻诊断中的应用价值。

1材料和方法

1.1材料选取新鲜肿瘤组织标本100份,其中甲状腺肿瘤20份,乳腺肿瘤20份,胃肠道肿瘤20份,肺部肿瘤20份,子宫肿瘤20份,分别用组织印刷。

1.2方法

1.2.1冰冻切片准确选择病变部位,进行常规冰冻切片,快速HE染色。

1.2.2细胞学打印载玻片与肿瘤组织切片紧密接触。用均匀的力把它压在患病的组织上几次,以获得足够的细胞。进行细胞学印刷,自然干燥,用丙酮固定1分钟。

1.2.3仪器RHS组织处理仪器[3](意大利里程碑公司)可将true 空泵入反应容器,并利用微波加热和磁珠搅拌来均匀加热容器中的液体,提高染色效果。

1.2.4将5 mol/lHCl的快速费尔根染色和脱氧核糖核酸染料溶液(武汉兰登)放入RHS true 空微波组织处理器中预热至60℃,将固定组织印模放入预热的5 mol/lHCl中5分钟,用水轻微洗涤,然后放入脱氧核糖核酸染料溶液处理器中10分钟。进行常规脱水、透明和中性口香糖密封。将组织印迹放入全自动脱氧核糖核酸图像分析系统以确定结果。

2结果

用RHS true 空微波组织处理器对100个新鲜肿瘤组织(图1)进行快速弗氏染色后,由全自动脱氧核糖核酸图像分析系统(图2)做出的诊断与肿瘤组织的快速冷冻病理诊断一致,并且通过随后的常规石蜡切片HE染色(图3)和免疫组织化学染色诊断(图4)确认结果准确且一致。

3讨论

在快速冷冻病理诊断中,往往很难在显微镜下短时间内确定组织细胞的形态,并做出良恶性肿瘤的诊断。细胞脱氧核糖核酸含量和倍性分析可以提供重要的参考数据。将脱氧核糖核酸含量分析方法应用于病理诊断,有助于降低诊断难度,提高诊断水平,已得到广泛应用。脱氧核糖核酸含量和倍性分析不会及时增加太多。例如,如果能在印刷版上准确获得更多多倍体细胞,特别是如果有非整倍体细胞,无论它们的细胞形态如何变化,都可以被视为判断恶性肿瘤的最有力证据[4]。然而,传统的弗氏染色通常需要2小时以上,因此不适合辅助快速病理诊断。改进的快速费尔根染色法使这一要求成为可能。RSH true 空微波组织处理器控制微波发射功率和红外线,通过微型计算机精确控制温度。结合100毫巴真实空环境,原子核可以被更快地着色。在磁力搅拌器的作用下,染色过程比普通微波炉更稳定,重复性更高。此外,组织印痕容易制作,印痕中的细胞都有完整的细胞核,正常切片中没有不完整的细胞核。脱氧核糖核酸含量检测结果能更好地反映肿瘤细胞的脱氧核糖核酸含量。利用医用RHS true 空微波处理器进行快速费尔根染色的组织印刷,结合全自动的脱氧核糖核酸图像分析系统,可以成为快速冷冻病理诊断中的重要辅助诊断方法。

参考:

[1]金日南,夏超冲。三种弗氏染色方法的比较[[]。中国体视学与图像分析杂志,2006,11( 1): 39 -44。

[2]芮菊生,杜毛琴,陈海明,等.组织切片技术[硕士]。北京:人民教育出版社,1980.213 -217。

[3]王平,朱建平。快速微波技术在骨组织脱钙中的应用[。中国诊断病理学杂志,2012,19 (1): 75。

[4]赵久飞,任丽,李伟,等.术中组织印痕细胞染色体倍性分析在乳腺疾病诊断中的意义[]。中国诊断病理学杂志,2013,20( 12): 744 -747。