68800字硕士毕业论文实验分析了Runx2在口腔鳞状细胞癌组织中的标记方式。

论文类型：硕士毕业论文

论文字数：68800字

论点：蛋白,细胞,肿瘤

论文概述：

Runx2在组织分化程度越低的口腔鳞状细胞癌组织中的表达越高，提示Runx2有望成为检测口腔鳞状细胞癌恶性程度的标记物。

论文正文：

第一章肿瘤学

口腔鳞状细胞癌(OSCC)由于其发病率和死亡率高，对人们的生活构成了巨大威胁。口腔鳞状细胞癌容易侵袭晚期转移，并且不能通过手术和其他治疗方法显著提高职业生涯率。同时，它还会导致患者面部器官和功能的丧失，从而极大地影响患者的职业质量。随着分子生物学的发展，特别是肿瘤分子生物学的发展，肿瘤的诊断和治疗已经大大加快。它在肿瘤诊断和治疗中有很大的潜力，因此了解口腔鳞状细胞癌的发病及口腔癌诊断和治疗的分子机制具有重要意义。癌基因和抑癌基因在机体的发育和分化中起着重要作用，这些基因的紊乱会导致肿瘤的发生。三个RUNT相关家族基因Runx1、Runx2和Runx3在人类发育和肿瘤形成中起着重要作用。
多瘤病毒增强子结合蛋白2/核心结合因子(PEBP2/核心结合因子，PEBP2/CBF)是由两个亚基α和β组成的异二聚体转录因子。有三个α亚单位，即Runx1、Runx2和Runx3[1]。这三种转录因子具有相同的进化保守的脱氧核糖核酸结合结构域，即RUNT。哺乳动物只有一个编码β亚单位的基因，PEBP2β/CBFβ。当PEBP2β与Runx蛋白异二聚化时，Runx蛋白与脱氧核糖核酸之间的亲和力会增加。此外，异二聚化可以通过防止RUNT结构域的泛素化来稳定RUNT 2。PEBP2β对于Runx白色驾驶的正常功能是必需的，PEBP2β的失活可以消除Runx功能。PEBP2/CBF调控的靶基因包括许多与肿瘤发生和细胞命运相关的基因。PEBP2/CBF复合物对基因的调节表现出时间和空特异性，可调节细胞分化、细胞周期进程、细胞增殖活性和其他功能[2]。Runx2是成骨细胞分化和成熟的关键调节因子。Runx2能促进特定成骨细胞因子如骨钙素、碱性磷酸酶和基质金属蛋白酶-13的表达。通常，基质金属蛋白酶在肿瘤细胞中的异常表达与肿瘤[3号的侵袭呈正相关；此外，Runx2能诱导与血管生成密切相关的骨髓内皮细胞迁移；然而，肿瘤可以诱导自身的血管生成。这种缺陷血管与肿瘤营养、细胞浸润和转移密切相关。Runx2可能与肿瘤血管生成有关[4]。研究表明前列腺癌细胞表达成骨相关蛋白，包括Runx2(骨发育的关键转录调节因子)及其下游靶标，如骨钙素、骨桥蛋白和唾液蛋白。Runx2还可以直接诱导与增殖、侵袭和转移相关的因子的表达，如基质金属蛋白酶-9和血管内皮生长因子，并促进原发性肿瘤上皮-间质转化[3]。然而，在中国没有关于人口腔癌组织中Runx2表达的报道。
本研究的目的是利用免疫组织化学技术检测润x2在口腔癌组织中的表达，并比较不同分化程度的OSCC润x2表达的差异。结合相关临床资料，了解Runx2在口腔癌组织发生发展中的作用机制，分析其表达与人口腔癌恶性程度和转移的相关性，寻找预测和治疗口腔癌发生转移的新分子靶点。探讨润x2与口腔癌预后的关系及其在口腔癌诊断和治疗中的可能作用，为进一步深入研究提供依据。

第二章文献综述Runx蛋白家族与恶性肿瘤的关系

2.1 Runx蛋白结构
Runx(runt结构域转录因子)家族基因，又称核心结合因子α家族、多聚增强子结合蛋白家族和急性髓系白血病家族。编码异二聚体多瘤病毒增强子结合蛋白。

核心结合因子(多瘤病毒增强子结合蛋白2(PEBP2)/核心结合因子，PEBP2/CBF)的2.2 α亚单位。哺乳动物含有三种Runx蛋白，包括Runx1、Runx2和Runx3，它们共享一个β亚单位。Runx蛋白与β亚基异二聚化后，Runx蛋白与脱氧核糖核酸的亲和力将显著增加。更重要的是，异二聚化可以通过阻止Runt结构域的泛素化来稳定Runt 2。β亚单位是Runx蛋白执行正常功能所必需的[5]。Runx蛋白的氨基酸序列包含高度保守的Runt结构域[1]和VWRPY基序，其通常位于c末端。此外，进化保守PY模块序列(PPxY)也很常见。此外，它还包括转录激活域、转录抑制域、核定位信号等域。研究表明，在其三维延伸结构中，Runt结构域具有S型免疫球蛋白折叠，并被发现与负责Runx蛋白核定位的STAT-(3信号传导子和转录激活子-3) [6)密切相关。Runx基因对个体发育非常重要，一旦被剔除，Runx基因将导致严重的发育缺陷。Runx蛋白可以调节许多与肿瘤发生和细胞命运相关的基因。

2.3 Runx与人类恶性肿瘤
2.3.1 RUNX1缺陷与白血病密切相关。Runx1在造血系统中起重要作用，其功能缺陷常导致白血病。吉姆·唐宁(Jim Downing)等人[7]首次通过靶向干预Runx1的功能，发现其在小鼠造血系统中的作用。Runx1是人类白血病患者染色体畸变最常见的部位。Runx1位于21.q22.3的基因位点，其编码的cDNA有12个变异体[8]。t(8；21)(q22；Q22)是急性髓系白血病中最常见的染色体易位，通常导致Runx1和MTG8(Runx1类似物)之间嵌合基因的形成。Runx1-MTG8融合蛋白是一种能与脱氧核糖核酸基序和CBFβ结合的核定位蛋白。然而，因为Runx1-MTG8融合蛋白在Runx1蛋白的c端缺乏反式激活序列，所以它不能与共激活因子CBP、p300等结合。因此Runx1-MTG8融合蛋白缺乏Runx1 [9]的反转录激活。在儿童急性淋巴细胞白血病中，t(12；21)(p13；Q22)染色体易位导致Runx1和TEL之间形成大量融合蛋白；此外，t(3；21)(q26；Q22)和t(16；21)(q24；Q22)染色体易位也形成大量融合蛋白。TEL-Runx1融合蛋白能竞争性结合Runx1的靶结合位点，抑制Runx1调节基因T细胞受体和白细胞介素-3 [10，11]的转录。统计数据显示，26%的人类急性白血病有Runx1基因突变。
研究表明Runx1造血干细胞和淋巴细胞的发育和分化是必要的。Runx1功能障碍与各种血液疾病有关，是造血系统的重要调节因子，[12]。在大多数情况下，参与Runx1定位的嵌合基因可以抑制Runx1功能，而在少数情况下，它们显示增强的Runx1功能。研究表明Runx1功能障碍阻碍粒细胞分化，突变体Runx1似乎在调节细胞周期中起着负面作用。条件击倒Runx1小鼠，并在这方面提供重要线索，[13]。如果Runx1嵌合基因导致Runx1基因失活，从而导致白血病，由Runx1突变引起的功能丧失也可能导致白血病。事实上，散发性和家族性杂合性和纯合性Runx1突变经常发生在白血病患者中，这使得他们易患急性髓系白血病。此外，基因突变引起的Runx1功能增强也可能是白血病。例如，与唐氏综合征相关的急性巨核细胞白血病可能是由额外的Runx1复制引起的，因为唐氏综合征是由染色体21的三体性引起的，这表明过量的Runx1可能导致白血病。因此，Runx1表达水平的精确调节对于身体的正常生理功能非常重要。
2.3.2 RUNX2促进人类恶性肿瘤进展的可能机制RUNX2蛋白包含一个Runt结构域、一个核定位信号、三个转录激活区(AD)、一个转录抑制区，其他结构域的功能尚不清楚。Runx2通过与CBFβ形成异二聚体来增加Runt对脱氧核糖核酸的亲和力，并保护其免受快速降解。Runx2有3个不同n端序列的变体。ⅰ型n端起始序列为MRIPVD，ⅱ型为MASNSL，ⅲ型为MLHSPH。它分别由两种不同的转录启动子P1和PZ调节。此外，在两个启动子序列中还有许多其他转录因子结合位点，如Ap-1(激活蛋白1)、NF-kb(活化db细胞的核因子κ-轻链增强子)、HLH(血细胞淋巴组织增生)和C-myb(肌成纤维细胞增生)等。[18]。
2.3.2.1 Runx2影响肿瘤细胞的迁移和浸润。Runx2是成骨细胞分化和成熟的关键调节因子。Runx2能促进特定成骨细胞因子骨钙素、碱性磷酸酶、基质金属蛋白酶等的表达。通常，基质金属蛋白酶在肿瘤细胞中的异常表达与肿瘤[3号的侵袭呈正相关；此外，Runx2能诱导与血管生成密切相关的骨髓内皮细胞迁移；然而，肿瘤可以诱导自身的血管生成。这种缺陷血管与肿瘤营养和细胞浸润转移密切相关，因此Runx2可能与肿瘤血管生成有关[4]。研究表明前列腺癌细胞表达成骨相关蛋白，包括Runx2及其下游靶点，如骨钙素、骨桥蛋白和骨整合。越来越多的证据表明，前列腺癌的转移能力受Runx2的调控。

目录
第三章实验研究.........................................9
3.1材料和方法.............................9
3.1.1主试剂..............................9
3.1.2文书.........................................9
第4章讨论.............................................16[/溴/]第5章结论.........................................19

结论
1。runx2的高表达与良性和恶性上皮病变以及口腔鳞状细胞癌的进展有关。Runx2可能是口腔鳞状细胞癌早期诊断的辅助指标。
2。Runx2在组织分化程度较低的口腔鳞状细胞癌组织中的表达越高，runx2越有可能成为检测口腔鳞状细胞癌恶性程度的标志物。

参考
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