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38900字硕士毕业论文牛IFNT基因的特征及TEAD和YAP1基因对其表达的影响。

论文类型:硕士毕业论文
论文字数:38900字
论点:胚胎,妊娠,发情
论文概述:

本研究在前人研究的基础上,进一步分析牛 IFNT 蛋白不同亚型结构及功能差异,并从牛 IFNT 基因的启动子区域分析入手,研究了 TEAD 家族及 YAP1 对 IFNT 基因表达的调控作用并对其潜在的调控区域

论文正文:

1以前的声明

妊娠的成功直接决定了动物种群的扩张和延续。对于畜牧业来说,妊娠的成功直接决定了畜牧业的发展。反刍动物妊娠的建立从受精卵开始,受精卵从输卵管进入子宫后,发育到胚泡阶段。此时,胚泡需要向母亲发送信号,通知她胚泡的存在。在收到胚泡的信号后,母亲的子宫产生相应的反应,分泌胚胎生长发育所需的大量因子,调节子宫的局部免疫系统,并为胚胎植入做准备。只有当胚胎成功附着在母亲的子宫上,才能保证胚胎的进一步正常发育。母亲和胎儿之间的这种交流是成功受孕的必要条件。相反,妊娠失败大多是由异常过程引起的。根据联合国粮农组织2009年发布的统计数据,中国有5.23亿头猪,占世界总量的50.9%,居世界第一。绵羊有2.19亿只,占世界总量的18.72%,居世界首位。山羊数量为2.46亿只,占世界总量的25.14%,居世界首位。牛的数量为1.89亿头,占世界总量的9.2%,居世界第三位。肉类总产量达到1.0845亿吨,禽蛋(不含蛋)846万吨,蛋类3578.6万吨,奶类3785万吨,其中肉类占世界总产量的30%,禽蛋80%,蛋类40%,奶类5%。以上数据表明,畜牧业已经成为中国农业和农村经济最具活力的增长点和最重要的支柱产业。然而,我国畜牧业发展中仍有许多不足和问题需要解决。反刍动物妊娠成功率低是世界上普遍存在的问题,也是阻碍反刍动物生产发展的重要原因。一些研究表明,尽管反刍动物受精的成功率为90-100%,但高达50%的妊娠以失败告终,成功分娩率仅为55%。70-80%的奶牛妊娠失败发生在人工授精后8-16天,即胚胎植入的早期阶段,涉及一些重要的生理过程,如早期胚胎发育和母体对妊娠的识别[1,2]。随着体外受精、胚胎移植和克隆技术的应用,妊娠成功率有所提高,但仍处于相对较低的水平
1.1孕产妇对妊娠的认识
孕产妇对妊娠的认识涉及一系列重要的生理过程,如正常发情周期、黄体退化机制和胚胎发育。在此期间,早期胚胎必须及时向母体系统提供生物信号以指示其在子宫中的存在,并通过防止黄体溶解或改善黄体功能来维持母体血液中的高孕酮水平,从而维持妊娠
1.1.1正常发情周期
当雌性动物性成熟时,它通常在其繁殖期间经历发情周期。正常的发情期包括两个主要阶段:卵泡期和黄体期。卵泡期从黄体退化到下一次排卵。在这个阶段,初级卵泡逐渐成长为优势卵泡并分泌雌激素(雌二醇,E2)。黄体期从排卵开始,退化为黄体。在这个阶段,黄体是卵巢的主要结构,孕酮(P4)是这个阶段的主要激素。发情周期子宫内膜的基因表达变化主要由卵泡雌激素和黄体孕酮通过其在子宫细胞上的受体调节。。灵长类动物和马的胚胎滋养层通过分泌具有黄体生成功能的绒毛膜促性腺激素来确保黄体功能并维持孕酮分泌
1.1.2黄体退化机制
家畜是一种自发性排卵动物。它的自发排卵主要通过子宫依赖性
结论来控制黄体的寿命和发情周期,因为子宫是黄体生成激素前列腺素F2α(PGF2α)的来源。在非妊娠牛羊中,子宫内膜在催产素的诱导下会脉冲释放PGF2α,PGF2α会通过局部对流交换机制转运至卵巢,这将导致黄体
1。本实验研究了牛IFNT蛋白IFNT1和IFNTc1两种不同亚型之间的功能差异。干扰素T1可诱导牛子宫内膜上皮细胞MX2基因表达,但干扰素t1不具有这种功能。
2。通过研究同源基因蛋白IFNT1和IFNT1之间的结构差异,发现IFNT1蛋白具有酪蛋白激酶区(CK2区),但IFNT1不具有。IFNT1基因突变使IFNT1蛋白具有CK2区后,IFNT1还具有诱导子宫内膜上皮细胞MX2基因表达的功能。
3。系统检测了YAP1基因和TEAD家族基因在牛胚胎和器官中的表达。研究发现,除了TEAD2在不同器官中很少表达外,其他基因也可以在牛胚胎和器官中表达。移植后牛胚胎中YAP1、tad1、tad2、TEAD4的表达显著增加。
4。结果表明,YAP1能上调IFNTc1基因的表达,但其上调不受IFNTc1基因5’端上游区域切除或点突变的影响。这表明它不直接结合到IFNTc1基因5’端的上游区域。
5。研究了TEAD家族基因对干扰素Tc1基因表达的影响。结果表明,TEAD·D4显著上调-631-IFNTc1报告基因的表达,TEAD·D4在IFNTc1基因5’端上游区域的作用范围可能在631-383个碱基之间。的结构和功能退化。启动黄体退化的前列腺素F2α源自子宫腔上皮细胞(LE)和浅表腺上皮细胞(sGE)
参考
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2材料和方法来维持黄体功能;τ(干扰素τ是反刍动物启动母体妊娠识别的关键因素,
2.1试验材料
2.1.1试验动物样品
本试验中使用的动物样品是日本黑发奶牛和荷斯坦奶牛。所有参与实验的动物操作都获得了东京大学实验动物委员会和真野胚胎移植中心的批准。同期发情、超数排卵和胚胎移植在Ideta[224]中有描述。首先,对日本黑发和牛进行超数排卵和人工受精,收集怀孕第七天的胚胎(第0天=发情期)。收集的12个胚胎在发情期第7天通过非手术方式移植到3头荷斯坦奶牛的子宫角(每头4个)。妊娠第17、20和22天延长期的胚胎通过非手术子宫冲洗获得。子宫清洗后的胚胎以1000转/分钟的速度离心5分钟,并快速冷冻保存。荷斯坦奶牛的器官:心脏、肺、肝、肾、脾、肌肉、皮肤、胎盘和乳房被手术取出、冷冻和储存,并送往东京大学动物繁殖实验室检查。。此外,研究表明,孕产妇妊娠识别过程中的胚胎死亡与新东方
3结果和分析...28
3.1干扰素蛋白对子宫内膜细胞影响的研究....28
3.2 TEAD和YAP1对牛干扰素基因表达的调控....32
3.2.1牛胚胎和器官中的TEAD家族....32
3.2.2牛胚胎中TEAD家族的实时聚合酶链反应检测....34
3 . 2 . 3 TEAD家族荧光酶分析检测....35
4讨论.......41
4.1牛干扰素T1和干扰素c1蛋白的结构和功能分析........41[/溴/]4.2 tead家族和YAP1对干扰素基因表达的调节....42
4.3干扰素的生物学特性....44有重要关系。,远未达到提高家畜繁殖率的标准。而且,胚胎移植不能从根本上解决妊娠成功率低的问题,决定妊娠成败的关键是妊娠的建立过程。胚胎着床过程中母胎相互作用的研究将成为解决反刍动物繁殖率低的重要课题。

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