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2200字职称论文医学技术论文参考资料:双酚a对孕妇绒毛组织影响的探讨

论文类型:职称论文
论文字数:2200字
论点:浓度,胚胎,绒毛
论文概述:

当前双酚A对人类生殖毒性影响的研究较少,而且低剂量的双酚A对慢性生殖毒性研究更有意义。通过多种机制产生类雌激素或抗激素作用,从而干扰内分泌系统的正常功能,对机体产生多方面的影响

论文正文:

前言

BPA是一种环境内分泌干扰物,具有类雌激素样作用。BPA进入机体后与细胞内雌激素受体结合,通过多种机制产生类雌激素或抗激素作用,从而干扰内分泌系统的正常功能,对机体产生多方面的影响。国内、外研究发现,在胚胎发育早期,低剂量BPA可影响人类的生长发育、性成熟、血液的激素水平、生殖器官的功能、免疫功能、脑细胞某些酶的活性和信号转导等。动物实验结果发现,BPA可以引起小鼠绒毛间质水肿、纤维素样坏死、胎盘功能障碍及胚胎的发育异常等。本中心就BPA对人早孕绒毛组织结构的影响的研究发现,BPA可导致绒毛发生病理学改变,同时发现BPA可刺激早期绒毛细胞分泌毬灢HCG。BPA是否对妊娠带来高风险值得深入的研究。因此,本实验拟通过分析BPA对人早孕绒毛的毒性作用及对胚胎发育的影响,探索BPA对人类妊娠可能存在的危害。

1 材料和方法

1.1 仪器与试剂
二氧化碳培养箱,超净工作台,倒置显微镜,MK3酶标仪(美国Thermo公司)。BPA(天津市大茂化学试剂厂产品),1640培养基 (sigma公司生产),人绒毛膜促性腺激素βHCG(丽珠医药),酶联免疫吸附测定试剂盒(上海武昊生物公司生产)。

1.2 实验分组及孕妇基本情况
取孕6~8周人工流产新鲜绒毛组织40份,分为4组,使BPA的终浓度分别为1000×10-6g/L(A组),500×10-6g/L(B组),1×10-6g/L(C组),D组为培养液对照组,每组10例。孕妇年龄为22~35岁,无心、肝、肾等严重疾病和生殖道感染性疾病。孕妇各组年龄、妊娠天数比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。新鲜绒毛组织经洗涤剪去蜕膜后,每份取绒毛0.5g用于实验。BPA溶于无水乙醇中稀释成不同浓度,随培养液加入各培养瓶。

1.3 体外培养
将新鲜绒毛0.5g置于5mL的1640培养液中,于370C、5%二氧化碳、95%湿度的培养箱中培养。培养液中加入不同浓度溶于乙醇的BPA,收集第1天、第3天的培养液,-200c冷冻保存,待ELISA检测TGFβ1、ADAM12、IGF1的浓度。

1.4暋ELISA检测培养上清TGF毬1、ADAM12及IGF1浓度
采用双抗体夹心ELISA法定量检测培养上清中TGFβ1、ADAM12及IGF1的浓度,按照人TGFβ1、ADAM12、IGF1的ELISA试剂盒的操作步骤检测上清液TGFβ1、ADAM12、IGF1的OD值。人TGFβ1检测敏感度为15.8pg/mL,板内、板间变异系数